Induction of pluripotent stem cells by reprogramming human ocular fibroblasts under xeno-free conditions / Indução de células-tronco pluripotentes pela reprogramação de fibroblastos oculares humanos sob condições xeno-livre

ABSTRACT Purposes: To develop an efficient and xeno-free standard eye-derived induced pluripotent stem cell reprogramming protocol for use during induced pluripotent stem cell-based cell therapies in treating retinal degenerative diseases and to compare the relative effectiveness of both animal- and non-animal-derived culture systems in the generation of induced pluripotent stem cells. Methods: Primary cultured human pterygium fibroblasts and human Tenon's capsule fibroblasts were induced to induced pluripotent stem cells using a non-in­tegrated virus under two xeno-free systems; as part of this study, a traditional non-xeno-free reprogramming system was also assessed. Induced pluripotent stem cell clones were selected and counted by live staining. Reprogramming efficiencies were evaluated between the fibroblasts and among different culture systems. In a series of experiments, such as PCR and immunofluorescence staining, the induced pluripotent stem cells were characterized. Results: Human pterygium fibroblast- and human Tenon's capsule fibroblast-derived induced pluripotent stem cells were successfully established using different reprogramming systems, under which they exhibited properties of induced pluripotent stem cells. Reprogramming efficiencies of induced pluripotent stem cells using the cell therapy system, the traditional system, and the E6/E8 system were 0.014%, 0.028%, and 0.001%, respectively, and those of human pterygium fibroblast- and human Tenon's capsule fibroblast-derived induced pluripotent stem cells-using the aforementioned systems-were 0.018% and 0.017%, respectively. Conclusions: Sendai virus facilitates induced pluripotent stem cell reprogramming of ocular fibroblasts-both human pterygium and human Tenon's capsule fibroblasts being safe and efficient for induced pluripotent stem cell reprogramming. Although the reprogramming efficiencies of ocular-derived induced pluripotent stem cells under xeno-free conditions were not superior to those observed using the traditional reprogramming system, the cell therapy system reprogramming system is a good option when induced pluripotent stem cells are to be induced under xeno-free conditions.

RESUMO Objetivos: Desenvolver um protocolo padrão, eficiente e xeno-livre, para a reprogramação de células-tronco pluripotentes induzidas, que possa ser usado durante as terapias de células-tronco pluripotentes induzidas para o tratamento de doenças degenerativas da retina, e comparar a eficácia relativa de sistemas de cultivo de origem animal e de origem não animal na geração de células-tronco pluripotentes induzidas. Métodos: Cultivos primários de fibroblastos de pterígio humano e de fibroblastos da cápsula de Tenon humanos foram induzidos a células-tronco pluripotentes induzidas usando um vírus não integrado sob dois sistemas xeno-livres; um sistema tradicional de reprogramação não xeno-livre também foi avaliado como parte deste estudo. Os clones de células-tronco pluripotentes induzidas foram selecionados e contados por coloração de células vivas. As eficiências de reprogramação foram avaliadas entre os diferentes fibroblastos e entre os diferentes sistemas de cultivo. Uma série de experimentos, como o PCR e a coloração por imunofluorescência, foram conduzidos para caracterizar as células-tronco pluripotentes induzidas. Resultados: Célu­las-tronco pluripotentes induzidas derivadas de fibroblastos de pterígio humano e fibroblastos da cápsula de Tenon humanos foram estabelecidas com sucesso sob diferentes sistemas de reprogramação e exibiram propriedades de células-tronco pluripotentes induzidas. As eficiências de reprogramação das células-tronco pluripotentes induzidas usando o sistema de terapia celular, o sistema tradicional e o sistema E6/E8 foram 0,014, 0,028% e 0,001%, respectivamente. Além disso, as efi­ciências de reprogramação de células-tronco pluripotentes induzidas derivadas de fibroblastos de pterígio humano e de fibroblastos da cápsula de Tenon humanos usando todos os sistemas acima foram de 0,018% e 0,017%, respectivamente. Conclusões: O vírus Sendai pode ser usado para facilitar a reprogramação de fibroblastos oculares pelas células-tronco pluripotentes induzidas. Tanto os fibroblastos de pterígio humano quanto os fibroblastos da cápsula de Tenon humanos são seguros e eficientes para a reprogramação de células-tronco pluripotentes induzidas. Embora as eficiências de reprogramação das células-tronco pluripotentes induzidas de origem ocular sob condições xeno-livres não tenham sido superiores às eficiências observadas para o sistema tradicional de reprogramação, o sistema de reprogramação sistema de terapia celular é uma boa opção para a indução de células-tronco pluripotentes induzidas sob condições xeno-livres.

Extracellular matrix and fibroblast injection produces pterygium-like lesion in rabbits

BACKGROUND: Translational research to develop pharmaceutical and surgical treatments for pterygium requires a reliable and easy to produce animal model. Extracellular matrix and fibroblast are important components of pterygium. The aim of this study was to analyze the effect of the subconjunctival injection of fibroblast cells (NIH3T3 cell line) and exogenous extracellular matrix in rabbits in producing a pterygium-like lesion. METHODS: Six 3-month-old white New Zealand rabbits were injected with 20,000 NIH3T3 cells and 5 µL of Matrigel in the right conjunctiva, and with only 5 µL of Matrigel in the left conjunctiva. The eyes were photographed under a magnification of 16× using a 12-megapixel digital camera attached to the microscope on day 1,3 and 7. Conjunctival vascularization was measured by analyzing images to measure red pixel saturation. Area of corneal and conjunctival fibrovascular tissue formation on the site of injection was assessed by analyzing the images on day 3 and 7 using area measurement software. Histopathologic characteristics were determined in the rabbit tissues and compared with a human primary pterygium. RESULTS: The two treatments promoted growth of conjunctival fibrovascular tissue at day 7. The red pixel saturation and area of fibrovascular tissue developed was significantly higher in right eyes (p < 0.05). Tissues from both treatments showed neovascularization in lesser extent to that observed in human pterygium. Acanthosis, stromal inflammation, and edema were found in tissues of both treatments. No elastosis was found in either treatment. CONCLUSIONS: Matrigel alone or in combination with NIH3T3 cells injected into the rabbits' conjunctiva can promote tissue growth with characteristics of human pterygium, including neovascularization, acanthosis, stromal inflammation, and edema. The combination of Matrigel with NIH3T3 cells seems to have an additive effect on the size and redness of the pterygium-like tissue developed.

Corneal endothelial cell density and pterygium: a cross-sectional study / Contagem de células endoteliais e pterígio: um estudo transversal

ABSTRACT Purpose: To investigate the effects of pterygium on corneal endothelial cell density in patients with unilateral pterygium. Methods: We performed a cross-sectional analysis of data from patients with unilateral pterygium who were selected from September 1, 2015 to July 31, 2016 at Hospital de Base do Distrito Federal to assess the corneal endothelial cell density, coefficient of variation in the cell area, hexagonality, and corneal pa­chymetric results. In all patients, noncontact specular microscopy was performed in both eyes and a minimum endothelial cell count of 75 cells/mm2 was required for inclusion in the study. The contralateral eye served as the control. Results: Sixty-one patients were included in the study. Twenty-nine (47.5%) patients were men and 32 (52.5%) were women (mean age, 50.84 ± 13.8). The percentage of pterygium that invaded the cornea ranged from 4.87% to 24.59% (median, 9.70% ± 4.99%). The mean corneal endothelial cell density (cells/mm) was lower in the pterygium eyes than in the controls (2451.83 ± 284.96 vs. 2549.95 ± 268.94, respectively; p=0.04). No differences in the mean coefficients of variation of cell size, hexagonality, and corneal pachymetric results were observed between the patients and controls. The Pearson correlation test showed a significant negative linear relationship between pterygium invasion and endothelial cell density [p<0.001, n=61, r=-0.553 (95% CI, -0.34 to -0.73)]. Conclusion: Compared with the contralateral eyes, those of patients with unilateral pterygium were associated with a decrease in corneal endothelial cell density.

RESUMO Objetivo: Investigar os efeitos do pterígio na densidade de células endoteliais cor­neanas em pacientes com pterígio unilateral. Métodos: Foi realizado um estudo do tipo transversal envolvendo pacientes com pterígio unilateral selecionados entre 1 de setembro de 2015 a 31 de julho de 2016 no Hospital de Base do Distrito Federal para avaliar a densidade de células endoteliais corneanas, coeficiente de variação da área celular, hexagonalidade, e paquimetria corneana. Em todos os pacientes foram realizadas microscopias especulares de não-contato em ambos os olhos, sendo necessário obter uma contagem endotelial mínima de 75 células/mm2 para que o paciente fosse incluído no estudo. O olho contralateral funcionou como grupo controle. Resultados: Um total de 61 pacientes foram incluídos no estudo. Vinte e nove (47,5%) eram homens e 32 (52,5%) mulheres. A média de idade era de 50,84 ±13,8. O percentual de invasão do pterígio na córnea variou entre 4,87% a 24,59%, com uma mediana de 9,70% ± 4,99%. A media de densidade de células endoteliais corneanas foi menor nos olhos com pterígio quando comparados ao grupo controle (2451,83 ± 284,96 vs 2549,95 ± 268,94; p=0,04). Não foram encontradas diferenças entre os casos e controles em relação à média do coeficiente de variação da área celular, hexagonalidade, e paquimetria. Teste de correlação de Pearson mostrou uma relação linear negativa entre a invasão do pterígio e a densidade de células endoteliais corneanas [p<0,001, n=61, r=-0,553 (95% CI -0,34 a -0,73)]. Conclusão: Em pacientes com pterígio unilateral, o olho com pterígio está asso­ciado a uma menor densidade de células endoteliais corneanas quando comparado ao olho contralateral.

Avaliação de aplicação única subconjuntival pré-operatória de mitomicina C em pterígio primário / Evaluation of preoperative subconjunctival single application of mitomycin C in primary pterygium

Resumo Pterígios são lesões geralmente benignas que na maioria dos casos não requer tratamento específico. É um crescimento fibrovascular sobre a córnea, geralmente a partir do lado nasal. Sua causa ainda não foi elucidada, mas parece estar relacionada à exposição aos raios ultravioleta. Quando os sintomas não são controlados com tratamento conservador, a cirurgia é indicada, porém o índice de recidiva ainda é alto, e os esforços têm sido no sentido de reduzir esse índice. A mitomicina C (MMC) é uma opção de adjuvante à cirurgia por ser um inibidor da proliferação de fibroblastos, diminuindo o risco de recorrência do pterígio. Relatamos aqui um caso que descreve cirurgia de pterígio realizada em ambos os olhos de uma mesma paciente, sendo um com MMC e outro sem ela. Os resultados e o índice de proliferação celular dos dois olhos foram comparados entre si.

Abstract Pterygia are usually benign lesions that do not require specific treatment. It is a fibrovascular growth onto the nasal side of the cornea. It`s cause has not been fully elucidated yet, but seems to be related to long -term ultraviolet ray exposure. When symptoms are not controlled with conservative treatment surgery is considered, but the recurrence rate is still high, and efforts have been made to avoid it. Mitomycin C (MMC) is a fibroblast proliferation inhibitor that can be used as adjuvant to surgery to reduce recurrence. We report here a case that describes pterygium surgery performed in both eyes of the same patient, being one with MMC and the other eye without it. Both pterygium were sent to laboratory analysis. The results and proliferation index were compared between the eyes.

Exposição de fibroblastos de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal à triancinolona / Exposure of recurrent pterygium and normal Tenon's capsule fibroblasts to triamcinolone

OBJETIVO: Avaliar a taxa de proliferação de fibroblastos provenientes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, quando expostos in vitro à triancinolona. MÉTODOS: Foram realizadas culturas primárias de explantes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal do mesmo portador do pterígio. Os fibroblastos foram cultivados e subcultivados até a terceira passagem e posteriormente expostos à triancinolona, com avaliação da taxa de proliferação celular após três, seis, 12 e 18 dias. RESULTADOS: Os fibroblastos expostos à triancinolona apresentaram taxa de proliferação significativamente menor (P<0,05) se comparados aos não expostos quando a avaliação foi feita após três, seis e 12 dias. Na avaliação do 18º dia houve retomada da taxa de proliferação, com significância estatística, somente nos fibroblastos provenientes de pterígios. CONCLUSÃO: Tanto os fibroblastos provenientes da cápsula de Tenon normal, quanto os de pterígios recidivados, apresentaram taxa de proliferação significativamente menor após a exposição à triancinolona. Os fibroblastos de pterígio retomaram a proliferação após 18 dias da exposição. Os resultados apontaram que a triancinolona pode ser útil como adjuvante no tratamento do pterígio.

PURPOSE: To evaluate the proliferation rate of recurrent pterygium and normal Tenon's capsule fibroblasts after exposure to triamcinolone. METHODS: Explants of recurrent pterygia and normal Tenon's capsule of the same carrier were cultured. The fibroblasts were cultured and subcultured until the third passage and subsequently exposed to triamcinolone. The cell proliferation rate was evaluated 3, 6, 12 and 18 days after the exposure. RESULTS: Fibroblasts exposed to triamcinolone had significantly lower proliferation rate (P <0.05) compared to those not exposed, when the evaluation was performed 3, 6 and 12 days later. In the 18th day after exposure, there was a return in the proliferation rate, with statistical significance, only in the pterigyum fibroblasts. CONCLUSION: Both the fibroblasts from normal Tenon's capsule as from recurrent pterygia showed significantly lower proliferation rate after exposure to triamcinolone. After 18 days from the exposition, pterygium fibroblasts recovered the proliferation. The results suggested the triamcinolone might be useful as adjuvant in pterygium treatment.

Nevo de células fusiformes de Reed na conjuntiva / Spindle cell nevus of Reed in the conjunctiva

Os autores relatam um caso de nevo de Reed, lesão que apresenta aspecto histológico de malignidade, mas tem evolução benigna. Paciente de 48 anos, masculino, cor parda, apresentava pterígio nasal no olho direito, associado a uma lesão pequena e pouco pigmentada localizada na cabeça do mesmo. Realizou-se exérese de ambos, sem intercorrências, sem sinais de recidiva. O exame histopatológico revelou lesão com bordas definidas, restrita ao epitélio, constituída por células fusiformes perpendiculares à superfície, com pigmentação melânica esparsa. O diagnóstico inicial foi nevo de Spitz, mas, posteriormente, chegou-se à conclusão que se tratava do nevo de células fusiformes de Reed. O presente relato é o segundo na literatura mundial e o primeiro no Brasil.

The authors report one case of nevus of Reed, which has histological aspect of malignancy, but a benign evolution. A 48-years-old brown skin male presented nasal pterygium in right eye, associated with a small and poorly pigmented lesion located on the pterygium head. Both were excised without complications and, currently, there is no recidivation. The histopathological examination revealed one lesion with defined edges, limited to the epithelium, consisted of spindle cells perpendiculars to the surface and with sparse melanin pigmentation. The initial diagnosis was Spitz nevus, but, afterwards, we concluded that was the spindle cell nevus of Reed. This report is the second in the international literature and the first in Brazil.

Fibrohistiocitoma conjuntival simulando pterígio atípico na região amazônica: relato de caso / Conjunctival fibrous histiocytoma simulating atipical pterygium in the Amazon region: case report

Relatamos um caso inédito na literatura brasileira de fibrohistiocitoma conjuntival descoberto durante projeto comunitário de larga escala realizado pela equipe do Centro de Referência em Oftalmologia do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás na região amazônica. Paciente do sexo feminino, leucoderma, de 38 anos de idade, apresentava lesão vascularizada no olho direito no canto medial da conjuntiva bulbar e carúncula com extensão para o limbo e invadindo cerca de 2 mm da córnea medial com configuração semelhante a um pterígio. O exame histopatológico revelou lesão constituída por células fusiformes, com arranjo estoriforme e células histiocitárias gigantes. A imunohistoquímica revelou forte positividade para vimentina e as células neoplásicas foram negativas para AE1/ AE3, HMB 45, proteína S 100. O diagnóstico histopatológico foi de fibrohistiocitoma. A evolução poderá demonstrar o crescimento tumoral e a possibilidade de lesão maligna.

An inedited case in the Brazilian literature of conjunctival fibrous histiocytoma discovered during a wide scale community project accomplished by the team of the Center of Reference in Ophthalmology of the Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás in the Amazon region is reported. A 38 year-old caucasian woman presented with a vascularized lesion on the medial portion of the bulbar conjunctiva and caruncular region of the right eye with extension for the limbus and invading about 2 mm of the medial cornea resembling a pterygium. Pathologic findings revealed that the lesion was constituted by spindle-shaped cells, with storiform arrangement, and large histocytelike cells. The immunohistochemistry revealed strong positivity for vimentin and the neoplastic cells were negative for AE1/AE3, HMB 45, S 100 protein. The histopathologic diagnosis was fibrous histiocytoma. The evolution demonstrated the tumoral growth and the possibility of a malignant lesion.

Exposição de fibroblastos provenientes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal ao tacrolimus (FK-506) / Fibroblasts from recurrent pterygium and normal Tenon's capsule exposed to tacrolimus (FK-506)

OBJETIVO: Avaliar a taxa de proliferação de fibroblastos provenientes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, quando expostos in vitro ao tacrolimus (FK 506). MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, controlado, avaliando-se 8 amostras de explantes de cápsula de Tenon de pterígios recidivados e 6 de cápsula de Tenon normal, obtidas na Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP. A cápsula de Tenon normal foi colhida da região temporal inferior, do mesmo portador de pterígio. As amostras foram cultivadas em meio específico e posteriormente expostas ao tacrolimus 1M (FK 506), em única exposição, com avaliação da taxa de proliferação celular 1, 5, 12 e 19 dias após a exposição. RESULTADOS: Avaliando-se a proliferação dos fibroblastos provenientes de cápsula de Tenon de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, os fibroblastos expostos ao tacrolimus tiveram taxa de proliferação significativamente menor (p<0,05) do que quando não houve exposição a droga, quando a avaliação foi feita 1 dia após a exposição. Quando a avaliação foi feita 19 dias após a exposição, a taxa de proliferação foi maior nos grupos expostos a droga. CONCLUSÃO: Os fibroblastos provenientes da cápsula de Tenon de pterígios recidivados apresentaram taxa de proliferação significativamente menor um dia após a exposição ao tacrolimus. Novos estudos devem ser realizados para definir dose e tempo de exposição dos fibroblastos a droga, com o intuito de definir se o tacrolimus pode ser útil como tratamento coadjuvante do pterígio.

PURPOSE: To evaluate fibroblast proliferation activity of normal Tenon's capsule and of recurrent pterygia exposed in vitro to tacrolimus (FK506). METHODS: A randomized prospective study was performed with 8 samples of recurrent pterygia and 6 samples of normal Tenon's capsule from the same patient with pterygium at the Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP. The samples were cultivated and exposed once to 1M tacrolimus (FK 506) and the proliferation rate was evaluated 1, 5, 12 and 19 days after the exposure. The data were statistically analyzed. RESULTS: The fibroblasts from pterygia exposed in vitro to tacrolimus had a significantly lower proliferation rate than controls after one day of exposure (p<0.05). Nineteen days after exposure to tacrolimus, exposed cells proliferated more than the non-exposed. CONCLUSION: Tacrolimus is effective to inhibit proliferation of Tenon's capsule fibroblasts from pterygia one day after exposure. Further studies are needed to define the role of tacrolimus in pterygium treatment.

Exposição de fibroblastos da cápsula de Tenon normal de portadores de pterígio ao 5-fluorouracil e à mitomicina C / Exposure of normal Tenon's capsule fibroblasts from pterygium to 5-fluorouracil and mitomycin C

OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon normal, proveniente de portadores de pterígios primários e recidivados. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, aleatório, avaliando-se fragmentos da cápsula de Tenon normal, removidos de 20 portadores de pterígios primários e 21, recidivados. A taxa de proliferação foi avaliada em fibroblastos de terceira passagem, quando as culturas foram expostas a agentes antimitóticos: mitomicina C e 5-fluorouracil. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 41 espécimes cultivados, apenas 1 de pterígio primário e 2 de recidivado proliferaram. Quando expostos a mitomicina C e ao 5-fluorouracil não houve diferença estatisticamente significativa quanto a inibição de proliferação celular. CONCLUSÃO: Desta forma, in vitro, ambos os antimitóticos estudados têm a mesma eficácia na inibição da proliferação sobre os fibroblastos de cápsulas de Tenon normal.

PURPOSE: To evaluate the fibroblast proliferation activity of normal Tenon's capsule from primary and recurrent patients with pterygium. METHODS: A randomized prospective study was performed with 41 normal Tenon's capsule fragments from 21 primary and 20 recurrent patients with pterygium. The sample was collected from the inferior cul-de-sac. Proliferation rate from fibroblasts were evaluated after mitomycin C and 5-fluorouracil exposition. Data were submitted to statistical analysis. RESULTS: Of the 41 cultivated normal Tenon's capsules, only 1 from primary and 2 from recurrent pterygium patients proliferated. After antimitotic exposition, the proliferation rate was similar with both drugs. CONCLUSION: Mitomycin and 5-fluorouracil promote similar inhibition regarding proliferation of normal Tenon's fibroblast cultures.

Exposição de fibroblastos da cápsula de Tenon de pterígios à ciclosporina 0.05 por cento / Exposure of Tenon's capsule fibroblasts of pterygium to cyclosporin 0.05 percent

OBJETIVO: Avaliar o comportamento dos fibroblastos da cápsula de Tenon de pterígios e normais em cultura, quando expostos a ciclosporina 0,05 por cento. MÉTODOS: Estudo prospectivo, controlado, do qual participaram 20 portadores de pterígio primário. Foram colhidas amostras da cápsula de Tenon normal e proveniente do pterígio, ambas do mesmo indivíduo, colocadas para crescimento em cultura e expostas a ciclosporina 0,05 por cento. As avaliações foram feitas aos 3, 6, 12 e 17 dias após a exposição. RESULTADOS: Das amostras colhidas, 7 foram utilizadas para exposição a ciclosporina - 6 provenientes de pterígios e 1 da Tenon normal. Houve redução significativa na proliferação celular das culturas de fibroblastos expostos a ciclosporina (p<0,05). CONCLUSÃO: A ciclosporina 0,05 por cento é capaz de inibir a proliferação de fibroblastos provenientes da cápsula de Tenon de pterígio e também da Tenon normal. Novos estudos devem ser providenciados para definir o papel da ciclosporina no tratamento do pterígio.

PURPOSE: To evaluate normal Tenon capsule fibroblasts and from pterygia in culture when exposed to cyclosporin 0.05 percent. METHODS: A prospective, randomized study was done, involving 20 patients with primary pterygium. Samples of normal and pterygium Tenon's capsule from the same individual were collected, cultured and exposed to cyclosporin 0.05 percent. RESULTS: Only 7 samples could be exposed to cyclosporin - 6 from pterygial Tenon's capsule and 1 from normal Tenon's capsule. There was a significant reduction of cellular proliferation in the cyclosporin exposed cultures (p<0.05). CONCLUSION: Cyclosporin 0.05 percent is effective to inhibit the proliferation of pterygia and normal Tenon's capsule fibroblasts. Further studies should be performed to define the role of cyclosporin in pterygium treatment.

Análise do cultivo de fibroblastos de pterígios primários e recidivados e da cápsula de Tenon normal / Fibroblasts from primary and recurrent pterygia and Tenon's capsule in cell culture

OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon, provenientes de explantes de pterígios primários e recidivados e da conjuntiva normal. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, randomizado, avaliando-se 43 pecas cirúrgicas, produto da exérese de 30 pterígios primários e 13 recidivados, além de fragmentos da cápsula de Tenon normal, obtida dos próprios portadores de pterígio. Foram avaliadas a taxa de proliferacão, migracão e confluência, analisadas segundo dados dos portadores como: idade, localizacão da lesão, tipo de lesão (tamanho, involutivo ou carnoso), primário ou recidivado. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 30 pterígios primários cultivados, 70 por cento migraram e proliferaram e 60 por cento chegaram à confluência. A migracão, proliferacão e confluência iniciaram-se mais precocemente nas culturas de fibroblastos provenientes de pterígios em comparacão àquelas provenientes da Tenon normal. Os pterígios recidivados apresentaram migracão mais precoce que os primários. Não houve diferenca estatisticamente significativa quanto ao início da migracão, proliferacão e confluência entre os pterígios carnosos ou involutivos, assim como entre os pterígios de graus I-II e os de graus III-IV. CONCLUSAO: O cultivo celular de fibroblastos de pterígios é mais viável que o de Tenon normal. A migracão, proliferacão e confluência diferem em pterígios primários e recidivados. Pterígios carnosos e involutivos são semelhantes em cultura, assim como não existe diferenca entre os pterígios segundo o tamanho da lesão.

Características de portadores de pterígio na região de Botucatu / Characteristics of patients with pterygium in the Botucatu region

OBJETIVO: Avaliar as características dos portadores de pterígio na região de Botucatu (SP). MÉTODOS: Portadores de pterígio foram avaliados quanto à idade, sexo, profissão, queixas e características da lesão (primário ou recidivado, tamanho, carnoso ou involutivo). Os dados foram submetidos à avaliação estatística. RESULTADOS: Cerca de metade dos portadores eram do sexo feminino, a maioria com idade superior a 40 anos, que procuraram o tratamento com queixa do efeito anti-estético da lesão. A maioria das lesões era primária (77,08 por cento), grau 2 (69,6 por cento) e do tipo carnoso (86,7 por cento). Pterígio grau 4 esteve presente em 1,4 por cento dos pacientes. CONCLUSAO: Observou-se maior freqüência de portadores de pterígio entre mulheres, acima dos 40 anos e portadoras de pterígio primário, grau 2 e carnoso. A cegueira por pterígio ainda está presente em nosso meio.

Split-conjunctival grafts for double-head pterygium.

PURPOSE: To describe the technique of split-conjunctival grafts (SCG) for double-head pterygia and to evaluate its postoperative outcome. METHOD: A retrospective analysis of seven eyes with primary double-head pterygium was done. All eyes received pterygium excision with split-conjunctival grafts harvested from the superior quadrant. All patients were followed up for recurrence of the lesion and incidence of complications. RESULTS: No recurrence was noted with a mean follow-up of 17.7 +/- 6 months. CONCLUSION: Split-conjunctival graft is a useful procedure for double-head pterygium.

Exposição de culturas de fibroblastos de pterígios primários e recidivados à agentes antiproliferativos / Exposure of cultures of fibroblasts of primary and recurrents pterygia to antiproliferative agents

Objetivo: Avaliar a proliferação dos fibroblastos de pterígios primários, recidivados e da cápsula de Tenon normal, em cultura de células, após a exposição à mitomicina C e ao 5-fluorouracil. Material e métodos: estudo prospectivo, casualizado. Os fibroblastos da terceira passagem foram expostos à mitomicina C a 0,4 %, durante 3 minutos e ao 5 – fluorouracil a 25mg/ml, mantido no meio nutritivo. Após 3, 6, 12, e 18 dias da exposição, foram realizadas contagens celulares com hemocitômetro, em triplicata, com um controle não exposto às drogas para cada dia. Os resultados foram submetidos à análise estatística. Resultados: A mitomicina C teve comportamento homogêneo, tanto sobre os fibroblastos da cápsula de tenon de pterígios primários, recidivados e da Tenon normal, inibindo a proliferação celular desde o primeiro dia de contagem. O 5 – fluorouracil, no grupo de pterígios primários e recidivados apresentou, inibição da proliferação celular somente após o sexto dia de avaliação, a partir de quando, ambas as drogas foram igualmente eficazes até o final do período experimental. No grupo da cápsula de Tenon normal, 0,5 – fluorouracil inibiu a proliferação desde o início. Os controles não expostos às drogas apresentaram número crescente de células ao longo do tempo. Conclusão: Ao final do período experimental, tanto o 5 – fluorouracil quanto a mitomicina C foram igualmente eficazes na inibição da proliferação dos fibroblastos de pterígios primários, recidivados e da cápsula de Tenon normal.

Unusual presentation of complex choristoma: a case report

Choristoma is a congenital local or circumscribed overgrowth of microscopically normal tissue in an inappropriate site. Choristoma in the eye is rare. In our patient, ocular choristoma manifested clinically as nasal pterygium. This case is of clinical interest since the diagnosis was made only by histopathological studies

Homoinjerto libre de conjuntiva en cirugía del pterigion: presentación de 151 casos / Free hamograft of conjuntive in surgery of pterigion: report of 151 cases

El pterigión es una patología muy frecuente en nuestro medio, y es objeto de una continua controversia debido a su alta recurrencia y a los múltiples procedimientos quirúrgicos que intentan resolverlo. El homoinjerto libre de conjuntiva, es una alternativa muy útil, pues es un tejido sano, protegido de los agentes irritativos externos y restablece la anatomía conjuntival con la conjuntiva sana del mismo individuo. En este estudio se pudo demostrar los excelentes resultados obtenidos (96,69 por ciento ) y la baja incidencia de recurrencia (3,31 por ciento ). En las recidivas (5 casos; 3,31 por ciento ) no ha habido un avance corneal del pterigión de más de 2 mm y en el área del injerto no se ha visto empañamiento de la córnea límbica sin ninguna vascularización. Los pacientes se encuentran asintomáticos, por lo que no hubo que recurrir a nueva cirugía en ninguno de los casos. Las complicaciones presentadas se manejaron de una manera sencilla y no influyeron en el resultado final de la cirugía. Fue obviado totalmente el uso de Betaterapia

Sindrome de pterigión popliteo: a proposito de un caso / Pterigion popliteo syndrome : by the way of a case

Se trata de un caso raro, describiéndose hasta la fecha unos 30 de ellos, cual se diagnostica por la presencia de pterigión popliteo, hueco del labio inferior, labio y paladar hendido y las anomalias genitales. La patogénesis es desconocida y no hay historia de consanguinidad en los padres

Análise histopatológica de pterígeos primários e recidivados / Histopathologic study of primary and recurrent pterygia

Analisou-se o diagnóstico histopatológico de 177 casos de pterígeos primários e recidivados, ressecados no HC da Fac. Med. da USP de 1982 a 1988, relacionando-o ao sexo, bilateralidade e idade. O diagnóstico histopatológico mais frequente entre os pteígeos primários foi o pterígeo verdadeiro (64,5%) e entre os recidivados foi o pterígeo predominou o sexo feminino (61,2% e 63,7%, respectivamente), a bilateralidade (69,0% e 72,8%, respectivamente). É ressaltada a possibilidade de neoplasias malignas em lesöes clinicamente sugestivas de pterígeos

Quantificaçäo dos mastócitos e dos vasos no pterígio / Quantification of mastocytes and vassels in pterygium

Os autores fazem estudo crítico da hipótese da reaçäo mastocitária como determinte do aparecimento do pterígio. Dados, como o da presença maior de mastócitos e vasos nos tecidos conjuntivos ativos no pterígio e a sua diminuiçäo nos inativos, podem sugerir a sua veracidade. No entanto, os dados näo säo täo linearmente confiáveis, motivo pelo qual os a. a. indicam prudência para a afirmaçäo